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应用视界丨效率提升3000倍!DREM cell解锁土壤“沉默基因库”

来源:   作者: 发布日期:2025-04-24 访问量:8

引言:

传统方法之困——99%的微生物资源为何“不可见”?传统微生物筛选依赖平板培养,但面临两大瓶颈:

✓效率低下:单次实验仅能筛选数百菌株,耗时数月;

✓“稀有菌盲区”:95%的微生物因丰度低、生长慢被忽视,成为“沉默基因库”。

本次研究由贵州大学与清华大学科研团队联袂主导,贵州大学李祝研究员、魏龙凤博士,携手清华大学张翀教授团队,将微生物学、农业生物工程、微流控技术与合成生物学领域的前沿深度融合,突破传统培养瓶颈,3小时筛选30万微生物,效率提升3000倍,并首次捕获Lelliottia、Buttiauxella等稀有拮抗菌。

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一、研究亮点

本研究通过DREM cell设备(高通量皮升级液滴单细胞分选系统),成功从魔芋根际土壤中筛选出32株对软腐病菌Ecc15具有显著抑制效果的拮抗菌,其中菌株D-62的抑菌圈直径达20.86mm,并在魔芋球茎实验中验证其生防潜力。研究对比传统平板培养发现:

1.多样性优势

DREM cell液滴培养的物种丰富度(ACE指数)较平板高3倍,检测到4,255个OTUs,涵盖33个细菌门,其中95%属于稀有生物圈(相对丰度<0.01%),包括Lelliottia、Buttiauxella等未报道的新资源。而平板培养仅获得638个OTUs,集中在17个门,其中优势菌(如Pseudomonas、 Acinetobacter )占比>80%。

2.效率提升

DREM cell单次筛选通量达3×105细胞/3小时,效率较传统方法提升3000倍,培养基消耗降低1.2×107倍。

3.成本优化

DREM cell设备自动化减少了人工干预,基础设施与耗材成本显著下降。


二、DREM cell如何赋能微生物研究

1.液滴生成

通过DREM cell液滴生成芯片生成14 pL均一液滴,基于泊松分布(λ~0.1)实现单细胞包被,单细胞包被率>90%,避免种间竞争,保留慢生长菌株。

液滴作为独立微反应器,液滴内培养基含土壤提取物(CESE),模拟自然环境,支持难培养微生物生长,成功培养出传统方法无法检测的稀有菌群(如Rhodococcus),拓宽资源库。



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2.液滴培养、检测

液滴在30°C培养3天,形成独立微反应器,引入GFP标记的软腐病菌(GFP-Ecc15)作为报告株,通过荧光信号实时监测拮抗活性(低荧光=抑菌)。

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3.液滴分选

通过DREM cell液滴分选芯片根据荧光强度筛选低信号液滴,富集拮抗菌,通量达3×105细胞/3小时。

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4.功能验证

分选菌株通过琼脂扩散法验证抑菌圈,结合16S rRNA测序鉴定物种,并通过魔芋球茎感染模型评估生防效果。

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三、技术对比


多样性分析:DREM cell液滴培养的α多样性指数(ACE、Chao1)显著高于平板(物种数提升3倍),检测到33个细菌门(平板仅17个),稀有菌占比>95%(如Lelliottia、Buttiauxella等)。

效率与成本:DREM cell筛选效率较传统平板筛选提升3000倍,培养基消耗降低1.2×107倍,人力成本减少80%。微升级试剂消耗,单次实验成本仅为传统方法的万分之一。

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四、研究结果与结论

1.研究结果


从魔芋根际土壤中筛选32株拮抗菌,分属9个属(如Serratia、Bacillus),其中菌株D-62(Bacillus sp.)抑菌圈直径达20.86 mm,显著抑制魔芋软腐病。DREM cell成功捕获传统方法未检测的稀有菌(如Leclercia等),验证液滴培养在微生物资源挖掘中的不可替代性。

D-62预处理使魔芋球茎感染斑直径降低60%,证实其田间应用潜力。

2.研究结论


DREM cell通过“单细胞包被-靶向分选-功能验证”闭环,实现高通量、低成本、高灵敏度的拮抗菌筛选,为植物病害生物防治提供新策略,尤其适用于稀有微生物资源开发。


关于DREM cell

DREM cell是一款集液滴生成、液滴分选、液滴微注入及液滴打印的多功能、高通量、全自动设备,其结合液滴微流控技术和介电泳分选技术,由多光路荧光检测系统、高速显微成像系统、自动对焦载物台、微全分析系统、介电泳分选系统、图像监控系统和强大的数据处理系统组成。

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关于我们

      天木生物专注于生物育种领域的高端仪器装备的开发与应用,致力于通过高效的突变技术和高通量筛选技术,改造提升产业传统菌种开发模式,为生物制造产业提质增效,提升我国生物产业的核心竞争力。 致力于为行业“细胞和菌种开发与筛选效率低”、“相关装备成本昂贵”、“产业化落地困难”等难题提供优秀的解决方案。

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引言:

传统方法之困——99%的微生物资源为何“不可见”?传统微生物筛选依赖平板培养,但面临两大瓶颈:

✓效率低下:单次实验仅能筛选数百菌株,耗时数月;

✓“稀有菌盲区”:95%的微生物因丰度低、生长慢被忽视,成为“沉默基因库”。

本次研究由贵州大学与清华大学科研团队联袂主导,贵州大学李祝研究员、魏龙凤博士,携手清华大学张翀教授团队,将微生物学、农业生物工程、微流控技术与合成生物学领域的前沿深度融合,突破传统培养瓶颈,3小时筛选30万微生物,效率提升3000倍,并首次捕获Lelliottia、Buttiauxella等稀有拮抗菌。

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一、研究亮点

本研究通过DREM cell设备(高通量皮升级液滴单细胞分选系统),成功从魔芋根际土壤中筛选出32株对软腐病菌Ecc15具有显著抑制效果的拮抗菌,其中菌株D-62的抑菌圈直径达20.86mm,并在魔芋球茎实验中验证其生防潜力。研究对比传统平板培养发现:

1.多样性优势

DREM cell液滴培养的物种丰富度(ACE指数)较平板高3倍,检测到4,255个OTUs,涵盖33个细菌门,其中95%属于稀有生物圈(相对丰度<0.01%),包括Lelliottia、Buttiauxella等未报道的新资源。而平板培养仅获得638个OTUs,集中在17个门,其中优势菌(如Pseudomonas、 Acinetobacter )占比>80%。

2.效率提升

DREM cell单次筛选通量达3×105细胞/3小时,效率较传统方法提升3000倍,培养基消耗降低1.2×107倍。

3.成本优化

DREM cell设备自动化减少了人工干预,基础设施与耗材成本显著下降。


二、DREM cell如何赋能微生物研究

1.液滴生成

通过DREM cell液滴生成芯片生成14 pL均一液滴,基于泊松分布(λ~0.1)实现单细胞包被,单细胞包被率>90%,避免种间竞争,保留慢生长菌株。

液滴作为独立微反应器,液滴内培养基含土壤提取物(CESE),模拟自然环境,支持难培养微生物生长,成功培养出传统方法无法检测的稀有菌群(如Rhodococcus),拓宽资源库。



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2.液滴培养、检测

液滴在30°C培养3天,形成独立微反应器,引入GFP标记的软腐病菌(GFP-Ecc15)作为报告株,通过荧光信号实时监测拮抗活性(低荧光=抑菌)。

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3.液滴分选

通过DREM cell液滴分选芯片根据荧光强度筛选低信号液滴,富集拮抗菌,通量达3×105细胞/3小时。

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4.功能验证

分选菌株通过琼脂扩散法验证抑菌圈,结合16S rRNA测序鉴定物种,并通过魔芋球茎感染模型评估生防效果。

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三、技术对比


多样性分析:DREM cell液滴培养的α多样性指数(ACE、Chao1)显著高于平板(物种数提升3倍),检测到33个细菌门(平板仅17个),稀有菌占比>95%(如Lelliottia、Buttiauxella等)。

效率与成本:DREM cell筛选效率较传统平板筛选提升3000倍,培养基消耗降低1.2×107倍,人力成本减少80%。微升级试剂消耗,单次实验成本仅为传统方法的万分之一。

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四、研究结果与结论

1.研究结果


从魔芋根际土壤中筛选32株拮抗菌,分属9个属(如Serratia、Bacillus),其中菌株D-62(Bacillus sp.)抑菌圈直径达20.86 mm,显著抑制魔芋软腐病。DREM cell成功捕获传统方法未检测的稀有菌(如Leclercia等),验证液滴培养在微生物资源挖掘中的不可替代性。

D-62预处理使魔芋球茎感染斑直径降低60%,证实其田间应用潜力。

2.研究结论


DREM cell通过“单细胞包被-靶向分选-功能验证”闭环,实现高通量、低成本、高灵敏度的拮抗菌筛选,为植物病害生物防治提供新策略,尤其适用于稀有微生物资源开发。


关于DREM cell

DREM cell是一款集液滴生成、液滴分选、液滴微注入及液滴打印的多功能、高通量、全自动设备,其结合液滴微流控技术和介电泳分选技术,由多光路荧光检测系统、高速显微成像系统、自动对焦载物台、微全分析系统、介电泳分选系统、图像监控系统和强大的数据处理系统组成。

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关于我们

      天木生物专注于生物育种领域的高端仪器装备的开发与应用,致力于通过高效的突变技术和高通量筛选技术,改造提升产业传统菌种开发模式,为生物制造产业提质增效,提升我国生物产业的核心竞争力。 致力于为行业“细胞和菌种开发与筛选效率低”、“相关装备成本昂贵”、“产业化落地困难”等难题提供优秀的解决方案。

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