咨询电话:0510-66901819

当前位置:首页>>资讯中心>>应用案例
当前位置:应用案例

应用ARTP突变技术选育非达霉素高产菌株

作者:清华研究院生物育种中心 发布时间:2017/10/26 浏览量:312

本期向您推荐的是华北制药集团新药研究开发有限责任公司关亚鹏、娄忻等2017年发表在《中国抗生素杂志》上“应用常压室温等离子体诱变技术选育非达霉素高产菌株”,内容简要如下:


        非达霉素(fidaxomicin)是一种大环内酯类抗生素,主要是通过抑制细菌的RNA聚合酶而产生迅速的抗难治梭状芽孢杆菌感染(CDI)作用,其治疗CDI的复发率和综合治愈率显著优于现有首选药物万古霉素和甲硝唑。非达霉素作为治疗及预防CDI复发的替代治疗新药,具有很大的应用前景。但目前仍处于实验室向工业化生产的转化阶段,亟需筛选到生产性能稳定。


        华北制药集团关亚鹏、娄忻等采用常压室温等离子体(ARTP)突变育种技术处理非达霉素生产菌N12W-396,结合非达霉素自身抗性筛选,获得了一株非达霉素高产突变菌FD-13-194,其摇瓶发酵能力提高了42.9%,且连续传代五代遗传特性稳定,在50L发酵罐中发酵208 h非达霉素产量可达2612μg/mL。该研究证明了,ARTP突变育种技术能够有效地作用于非达霉素产生菌,结合其自身产物抗性筛选是获得高产菌株的良好手段,有利于提高非达霉素的工业生产水平,为大规模工业化生产打下了基础。


精选内容如下:


ARTP诱变与优势菌株的筛选

微信图片_20180112135153

图2 出发菌株和20支突变株的非达霉素发酵产量

Fig. 2 The fidaxomicin production of the 20 mutants and original strain.


高产突变株遗传稳定性的验证

表2 菌株FD-13-194的传代稳定性

Tab. 2 Stability of the mutant strain FD-13-194


微信图片_20180112135156

高产突变株50L 发酵罐培养

微信图片_20180112135230

图3 突变株FD-13-194在50L发酵罐中的发酵过程

Fig. 3 The time course fidaxomicin fermentation of the mutant FD-13-194 in 50L fermentor